概述
Origami 2 (DE3) pLysS感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素,卡那和四环素三种抗生素抗性。
特点
- Origami 2系列感受态细胞是K-12细胞的衍生而来,在TrxB和Gor基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
应用
该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
使用说明
1. 从-80°C冰箱内取出E.coli Origami 2(DE3) pLysS Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。
2. 加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。
3. 42°C水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟左右,注意不要晃动。添加700 μl不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。
4. 37°C振荡培养1小时(160~225 rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37°C正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
组份
E.coli Origami 2 (DE3) pLysS Competent Cells 5 x 100 μl/10 x 100 μl pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
技术规格
规格 | 5 x 100 μl/10 x 100 μl |
基因型 | Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F′[lac+lacIq pro] (DE3) gor522::Tn10 trxB pLysS (CamR,StrR,TetR) |
转化效率 | 使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达10^7 cfu/μg DNA以上。 |
保存条件 | 长期储存于-80°C,可保存半年,避免反复冻融。 |