总谷胱甘肽检测试剂盒(Total Glutathione Assay Kit)是一种简单易行的检测总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的试剂盒。
谷胱甘肽(glutathione)是一种由3个氨基酸残基组成的小肽,全称为谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸,英文名称为glutamyl-cysteinyl-glycine,简称为glutathione。由于半胱氨酸上的巯基(SH)为谷胱甘肽的活性基团,所以常简写为G-SH或GSH。谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, 常称为GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide)两种形式。由于氧化型谷胱甘肽是由两个GSH通过巯基脱氢而成,所以常简写为G-S-S-G或GSSG。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源,对于维持蛋白质中巯基适当的氧化还原状态有重要作用,并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。
通过谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系,前后两个反应合并起来后,总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素,总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。
本试剂盒的具体反应原理如下:
两个反应相合并:
本试剂盒可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中总谷胱甘肽的含量。
本试剂盒提供了蛋白去除试剂S,可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的总谷胱甘肽的量。
本试剂盒的检测下限为1μM。一个试剂盒共可以进行100次检测。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0052-1 | 总谷胱甘肽检测缓冲液 | 60ml |
S0052-2 | 谷胱甘肽还原酶 | 150μl |
S0052-3 | 还原型谷胱甘肽(GSH) | 4.5mg |
S0052-4 | DTNB | 4.5mg |
S0052-5 | 蛋白去除试剂S | 0.4g |
S0052-6 | NADPH | 4mg |
S0052-7 | DMSO | 1.5ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。还原型谷胱甘肽配制成溶液后,需适当分装,-20℃保存至少3个月有效。DTNB溶解在DMSO中后,需适当分装,-20℃保存至少3个月有效。蛋白去除试剂S配制成溶液后可以4℃保存。NADPH溶解后,适当分装,-70℃保存。
注意事项:
本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应,所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定,请尽量避免。
一定要严格控制反应时的温度和反应时间,否则需每次都做标准曲线。
NADPH等试剂不太稳定,要严格按照后续说明操作,谨防失活。
DMSO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。