碧云天生产的BeyoFusion™ DNA Polymerase,是一种以嗜热古细菌DNA聚合酶(hyperthermophilic archaeon
Pyrococcus-like DNA polymerase)为基础通过突变等改造而获得的超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
BeyoFusion™ DNA Polymerase扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。BeyoFusion™ DNA polymerase由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
BeyoFusion™ DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。BeyoFusion™ DNA Polymerase不仅可以非常高效地催化
5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity),它的错误发生概率比Taq酶要低52倍,比pfu酶要约低6倍(参考表1)。
表1. BeyoFusion™ DNA polymerase的主要性能与Taq酶及同类产品的比较。
Product Name | Concentration | Manufactur | Velocity | Target Size | Fidelity | Product end |
Taq | 5U/μl | Various | 1min/kb | <3kb | 2.3×10-5/nt/cycle | 3'overhangs |
Pfu | 5U/μl | Various | 2min/kb | <5kb | 2.6×10-6/nt/cycle | Blunt |
Platinum Taq | 5U/μl | Thermo | 30s/kb | 15kb | 3.8×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
Phusion HF | 2U/μl | Thermo | 15-30s/kb | 20kb | 4.4×10-7/nt/cycle | Blunt |
LongAmp Taq | 2.5U/μl | NEB | 50s/kb | 30kb | 1.2×10-5/nt/cycle | 3'overhangs |
Phusion HF | 2U/μl | NEB | 15-30s/kb | 20kb | 4.6×10-7/nt/cycle | Blunt |
PfuUltra HF | 2.5U/μl | Agilent | 1-2min/kb | 17kb | 1.3×10-6/nt/cycle | Blunt |
PfuUltra II FH | - | Agilent | 15-30s/kb | 19kb | 1.2×10-6/nt/cycle | Blunt |
KOD Dash | 2.5U/μl | TOYOBO | 30s/kb | 18kb | 5.8×10-6/nt/cycle | 3'overhangs |
KOD FX | 1U/μl | TOYOBO | 30s-1min/kb | 40kb | 2.1×10-6/nt/cycle | Blunt |
BeyoFusion™ | 2.5U/μl | Beyotime | 15-60sec/kb | >12kb | 4.4×10-7/nt/cycle | Blunt |
BeyoFusion™ Plus | 2.5U/μl | Beyotime | 15-60sec/kb | >12kb | 2.2×10-6/nt/cycle | 3' overhangs |
BeyoFusion™ DNA Polymerase的扩增长度长,可以达到12kb。BeyoFusion™ DNA Polymerase非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb(参考图1和表1),更长片段的扩增效果未经测试。BeyoFusion™ DNA聚合酶可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。 图1. BeyoFusion™ DNA polymerase以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图。来源:BeyoFusion™ DNA polymerase通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。BeyoFusion™ DNA polymerase扩增出来的DNA片段为双平端(参考表1),可以直接用于双平端克隆,但不能直接用于常规的T载体克隆。如需用于T载体克隆,需在BeyoFusion™ DNA polymerase PCR扩增结束后加入常规量的普通Taq酶在72°C反应5-10分钟,使每条链的3’端加上一个A以形成粘端。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid
insoluble material in 30 minutes at 74°C.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v)
glycerol。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使BeyoFusion™ DNA polymerase失活。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7221-1 | BeyoFusion™ DNA polymerase (2.5U/μl) | 400μl |
D7221-2 | 10X BeyoFusion™ Buffer (with Mg2+) | 1.2ml×2 |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。