Caspase 1 活性检测试剂盒(Caspase 1 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 1酶活性或纯化的caspase 1酶活性的试剂盒。
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也称interkeukin 1b conberting enzyme(ICE),有时被写作caspase-1或caspase 1,是caspase家族中唯一可以剪切IL-1b前体蛋白或IL-18前体产生相应成熟的细胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前体蛋白,产生20kD和10kD的片段,这两个片段可以形成异源二聚体(heterodimer),并进一步由两个异源二聚体形成四聚体。Caspase 1可以通过剪切其凋亡Bcl-XL来调节细胞凋亡,并通过其对一些细胞因子前体的剪切来调控相关免疫反应。
本caspase 1活性检测试剂盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 1的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 1催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 1酶活性的标准品。
Caspase 1 活性检测试剂盒
Caspase 1 Activity Assay Kit (订货以英文为准)
编号:C1101
CAS号:1448-98-2
分子式:C4H5N3O2
分子量:127.10
产品名称 | Caspase 1 Activity Assay Kit |
中文名称 | Caspase 1 活性检测试剂盒 |
CAS号 | 1448-98-2 |
分子式(M.F.) | C4H5N3O2 |
分子量(M.W.) | 127.10 |
使用说明:
1.准备工作:
a.裂解液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
b.检测缓冲液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
2.测定pNA标准曲线:
a.标准品稀释液的配制:按照每0.9ml检测缓冲液加入0.1ml裂解液的比例配制适量的标准品稀释液。
b.把试剂盒提供的pNA (10mM)用标准品稀释液稀释为0、10、20、50、100和200μM,作为标准品。
c.每个浓度取100μl用酶标仪进行检测,或取适当量用容量不超过100μl的分光光度检测杯进行检测,测定A405。
d.每一个标准品的A405减去不含pNA的空白对照的A405计算出实际的因pNA而导致的吸光度,并制作出pNA浓度相对于A405的标准曲线。pNA标准曲线可以参考图1,在0-200μM范围内存在良好的线性关系。
图1.pNA标准曲线。实测数据可能因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅
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