TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)

Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit (订货以英文为准)

编号:C1098
CAS号:6294-89-9
分子式:C2H6N2O2
分子量:90.08
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C1098-500G TCI 500g ¥1160.00
C1098-25G TCI 25.00g ¥170.00
C1098 碧云天 50次 ¥2868.00
产品名称 Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
中文名称 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)
CAS号 6294-89-9
分子式(M.F.) C2H6N2O2
分子量(M.W.) 90.08

碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有 DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。(2)特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。(3)快速:仅需约2-3个小时即可完成。(4)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。(5) 实测效果好:参考图1。

使用说明:
1.对于贴壁细胞或细胞涂片:
a.用PBS或HBSS洗涤1次。
b.如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。
c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30分钟。
d.用PBS或HBSS洗涤1次。
e.加入碧云天生产的免疫染色强力通透液(P0097)或含0.3% Triton X-100的PBS,室温孵育5分钟。
f.用PBS或HBSS洗涤1次。
g.在碧云天生产的内源性过氧化物酶封闭液(P0100A)或PBS配制的0.3%过氧化氢溶液(0.3% H2O2 in PBS)中室温孵育20分钟,以灭活切片内源的过氧化物酶。随后用PBS或HBSS洗涤3次。
h. 转步骤5。
2.对于悬浮细胞或细胞悬液:
a.收集细胞(不超过200万细胞),用PBS或HBSS洗涤1次。
b.涂片,使细胞粘附在载玻片上。可以干燥样品使细胞贴得更牢,或使用适当的粘附试剂。
c.用碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。
d.用PBS或HBSS洗涤1次。
e.用加入碧云天生产的免疫染色强力通透液(P0097)或含0.3% Triton X-100的PBS,室温孵育5分钟。
f.用PBS或HBSS洗涤1次。
g.在碧云天生产的内源性过氧化

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