科研必看|蛋白组覆盖不足?【阿拉丁】多酶消化策略破局指南

在自下而上蛋白质组学中,酶切是决定肽段质量、质谱可检测性与覆盖深度的关键步骤。单一酶切在肽段覆盖范围上存在一定局限。
阿拉丁结合已有研究文献与实验实践,整理多酶消化策略与蛋白质组学覆盖度优化框架,为科研提供系统思路与参考方案。
01、核心逻辑:互补酶切提升覆盖度
多酶消化利用不同蛋白酶的切割偏好互补,构建更全面肽段集合,弥补单酶盲区,优化肽段特性,提升蛋白质组覆盖度与鉴定稳定性。
02、三种常用多酶消化策略
平行消化:同一样本分份后用多酶独立消化,结果清晰易对比,适合低丰度蛋白与广谱覆盖。
串联消化:先预切后精切,释放遮蔽序列,适配高分子量、难溶及膜蛋白样本。
复合消化:多酶同体系反应,流程相对简化,样本损耗较低,需控制酶活兼容条件。
03、常用酶组合
胰蛋白酶 + 适配酶:稳定性强,适用于深度蛋白质组学研究场景
胰蛋白酶 + 酸性切割酶:改善酸性区域与修饰位点覆盖
胰蛋白酶 + 疏水切割酶:提升疏水 / 跨膜蛋白检出率
胰蛋白酶 + 边界导向酶:优化序列边界与连接区覆盖
04、实验关键优化要点
样本前处理:变性、还原、烷基化,充分暴露酶切位点
酶切条件:控制酶底比、时间、pH 与离子强度,减少非特异切割
肽段处理:优化脱盐分级,提高回收效率,保障质谱检测
05、阿拉丁助力蛋白质组学研究
阿拉丁提供质谱级核心酶制剂及配套前处理试剂,纯度高、特异性强、批次间一致性通过质谱验证,适用于多酶消化与蛋白组覆盖优化流程。
合理运用多酶消化策略,有助于拓展单酶消化所不及的肽段覆盖范围,为提升蛋白鉴定深度与序列完整性创造有利条件,阿拉丁与科研同行一路相伴。
| 产品货号 | 产品名称 | 级别和纯度 |
| R1456327 | 快速胰蛋白酶(质谱级) | 无动物源,无载体,EnzymoPure™,重组,质谱级(MS),≥95%(SDS-PAGE),≥3800USP U/mg protein |
| S141078 | 重组胰蛋白酶 | EnzymoPure™,用于蛋白测序,质谱级(MS),≥4500 units/mg |
| E382042 | 蛋白内切酶Lys-C | EnzymoPure™,重组,≥3.0AU/mg protein |
| C331618 | 胰凝乳蛋白酶底物II,发荧光 | ≥98% |
| rp155400 | 重组谷氨酰内肽酶 | 无动物源,无载体,生物活性,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥95%(SDS-PAGE),≥5.0 AU/mg |
网址:https://www.sanhua-chem.com/
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