科研必看|蛋白组覆盖不足?【阿拉丁】多酶消化策略破局指南

 

         在自下而上蛋白质组学中,酶切是决定肽段质量、质谱可检测性与覆盖深度的关键步骤。单一酶切在肽段覆盖范围上存在一定局限。

 

        阿拉丁结合已有研究文献与实验实践,整理多酶消化策略与蛋白质组学覆盖度优化框架,为科研提供系统思路与参考方案。

 

01、核心逻辑:互补酶切提升覆盖度

 
 

 

        多酶消化利用不同蛋白酶的切割偏好互补,构建更全面肽段集合,弥补单酶盲区,优化肽段特性,提升蛋白质组覆盖度与鉴定稳定性。

 

02、三种常用多酶消化策略

 

 
 

平行消化:同一样本分份后用多酶独立消化,结果清晰易对比,适合低丰度蛋白与广谱覆盖。

串联消化:先预切后精切,释放遮蔽序列,适配高分子量、难溶及膜蛋白样本。

复合消化:多酶同体系反应,流程相对简化,样本损耗较低,需控制酶活兼容条件。

 

03、常用酶组合

 

 
 

胰蛋白酶 + 适配酶:稳定性强,适用于深度蛋白质组学研究场景

胰蛋白酶 + 酸性切割酶:改善酸性区域与修饰位点覆盖

胰蛋白酶 + 疏水切割酶:提升疏水 / 跨膜蛋白检出率

胰蛋白酶 + 边界导向酶:优化序列边界与连接区覆盖

 

04、实验关键优化要点

 

 
 

样本前处理:变性、还原、烷基化,充分暴露酶切位点

酶切条件:控制酶底比、时间、pH 与离子强度,减少非特异切割

肽段处理:优化脱盐分级,提高回收效率,保障质谱检测

 

05、阿拉丁助力蛋白质组学研究

 
 

 

         阿拉丁提供质谱级核心酶制剂及配套前处理试剂,纯度高、特异性强、批次间一致性通过质谱验证,适用于多酶消化与蛋白组覆盖优化流程。

 

       合理运用多酶消化策略,有助于拓展单酶消化所不及的肽段覆盖范围,为提升蛋白鉴定深度与序列完整性创造有利条件,阿拉丁与科研同行一路相伴。

 

产品货号 产品名称 级别和纯度
R1456327 快速胰蛋白酶(质谱级) 无动物源,无载体,EnzymoPure™,重组,质谱级(MS),≥95%(SDS-PAGE),≥3800USP U/mg protein
S141078 重组胰蛋白酶 EnzymoPure™,用于蛋白测序,质谱级(MS),≥4500 units/mg
E382042 蛋白内切酶Lys-C EnzymoPure™,重组,≥3.0AU/mg protein
C331618 胰凝乳蛋白酶底物II,发荧光 ≥98%
rp155400 重组谷氨酰内肽酶 无动物源,无载体,生物活性,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥95%(SDS-PAGE),≥5.0 AU/mg

 

 

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