步骤一：蛋白表达与裂解

       在大肠杆菌或哺乳动物细胞中表达目标蛋白后，使用裂解缓冲液进行细胞裂解。常搭配超声或反复冻融，确保释放蛋白质。

步骤二：亲和结合

       将裂解液加入Ni-NTA琼脂糖柱（或磁珠、预装柱），利用His标签与Ni²⁺之间的螯合作用，使目标蛋白特异性结合。

● 推荐试剂：UltraBio™ His-tag 纯化树脂、UltraBio™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠（TED-Ni）、Ni亲和层析预装柱（阿拉丁官网具有多规格可选）

步骤三：洗脱杂蛋白

       洗涤缓冲液中加入低浓度咪唑（10–30 mM），去除非特异性结合蛋白，同时保留目标蛋白在柱上结合。

 步骤四：蛋白洗脱

       使用高浓度咪唑（250–500 mM）洗脱目标蛋白。可搭配pH调节及NaCl调控，提升纯化效率与蛋白活性。

● 推荐试剂：咪唑、Tris-盐酸缓冲液、氯化钠、甘油、DL-二硫苏糖醇DTT

步骤五：蛋白缓冲液置换 / 浓缩

       经亲和洗脱后，目标蛋白可通过透析、离心浓缩或柱层析进行缓冲液更换，适应后续结构或功能实验。

★ 完整亲和纯化体系

       从亲和填料（Ni-NTA介质、Anti磁珠、预装柱）到高纯缓冲液组分（咪唑、Tris-盐酸缓冲液、甘油等），全流程覆盖，轻松实现纯化标准化。

★  高纯稳定，适合多系统表达

       阿拉丁试剂纯度高、蛋白兼容性强，适用于大肠杆菌、哺乳细胞、酵母等表达体系。

★  多规格灵活选择

       适配科研、药物开发与工艺优化所需，提供小包装到大包装填料规格，以及缓冲液等。

       从表达到洗脱，从实验室到产业级，阿拉丁蛋白质纯化相关产品始终为您的分离之路保驾护航。

部分亲和层析相关产品

网址：https://www.sanhua-chem.com/